重生08,我被确诊为医学泰斗 - 第200章 35%(感谢niu津面的盟主)

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    35(感谢牛津面的盟主!)

    学校的实验室条件没那么好。

    空调老化,地方不大,房间里人也有点多。

    条件算是艰苦吧,大家却一点不觉得累,一个个热血沸腾的,就想着快点把这个项目做出来。

    陈浩上次这么有动力的时候还是在大二夏天,跟老江去参加网吧举办的cs16网吧赛。

    时过境迁。

    曾经的4网瘾少年,现在已经变成使用移ye枪的高手了。

    蔡卓群将无酶水吸出,打入离心管底部,反复吹打。

    王晓晴观察片刻后说:“测一下吧。”

    蔡卓群点点头,拔下枪头,拿着样本走到nanodrop分光光度计前。

    用移ye枪吸取了1微升样本,滴在检测基座上,放下检测臂,在连接的旧台式电脑上点击了测量。

    屏幕上很快跳出了数据。

    陆晓林停下了手里的活,转头问道:“多少?”

    蔡卓群:“浓度12ng/ul,a260/280比值是132,a260/230比值是07。”

    王晓晴盯着屏幕看了一会儿,有点无奈:“这已经是第四批废样了……”

    项目的难度远远超出除江河外所有人的预期。

    虽然之前江河用加入d的方法,解决了pcr扩增阶段引物二聚体的问题。

    但解决了一个问题,接下来还会出现更多的问题……

    现在的瓶颈,卡在了提取上。

    irna在血ye中的含量极低,且非常容易被血ye中的rna酶降解。

    纯度不够。

    a260/280的比值正常应该在18到20之间,低于18就意味着样本中存在大量的蛋白质污染。

    而a260/230比值只有07,更是说明里面混了大量的酚类物质或者盐离子。

    用这种样本去做下一步的逆转录,杂质会让逆转录酶失活,后面的pcr扩增根本跑不出真实数据。

    蔡卓群试图寻找原因:“王教授,是不是氯仿的用量不够?我们在取上清ye的时候,可能还是带入了一些中间层的蛋白质。”

    王晓晴摇摇头:“上一批我们已经把氯仿的比例提高了百分之二十,离心时间也延长了五分钟,纯度是稍微好了一点,但是浓度直接掉到了5ng/ul以下。”

    陆晓林在一旁分析:“血清里全是蛋白,游离的核酸少,trizol提取法,用在血清上,天生就有缺陷。”

    实验室众人,陷入沉默。

    其实在后世,有专门针对血清的柱提法商业试剂盒,傻瓜式Cao作,半个小时就能得到高纯度的irna。

    但在08年,专门针对ye体活检的试剂盒在国内根本买不到,就算买到了技术也还远未成熟,所以只能用最基础的化学试剂,手工一步步去抠。

    蔡卓群问:“王教授,有什么办法没?”

    王晓晴:“别问我,江河呢?江河去哪儿了?”

    陈浩举手:“老江说有点事来着,马上回来。”

    王晓晴:“那大家先停一下吧,休息十分钟。”

    晓晴教授现在也是学聪明了。

    自己苦哈哈研究半天,不如江河回来一句话直接解决。

    与其浪费脑细胞,还不如休息休息,保存体力……

    众人出去休息时。

    易向晚和顾亦舟去给大家买水。

    在路上,易向晚罕见地没有开玩笑,略显忧愁的说道:

    “师兄,你说咱们这项目,到底能成吗?”

    顾亦舟看了他一眼:“怎么了?不想干了?”

    “哎呀,那肯定不是啊,只是……我在想一件事嗷,退一万步讲,就算我们今天把提取纯度的问题解决了,就算接下来的逆转录、pcr体系全部都解决了,然后呢?”

    顾亦舟皱着眉头。

    易向晚接着说:“我们该如何验证呢?既然是胰腺癌早筛,那到了最后,验证模型是否有效的话,我们需要真正的患者样本吧?”

    “而且,我们需要的是【看起来完全健康,但实际上刚患上极早期胰腺癌的患者的血】。”


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